HI实验在临床工作中应用广泛，结果判定快速，操作方法简单实用。但可能受一些因素影响，使得试验结果不准确，从而无法指导生产，因此对在实际操作中有可能出现的误差进行分析。

        1. 4单位抗原的配制

病毒的血凝价需准确，现用现配，在抗体测定前做回归试验。

        2.抗原

新抗原分装后保存，分批使用，可以减少反复冻融效价降低，加4单位抗原时必须边加边混匀。

        3.稀释液

        根据《高致病性禽流感诊断技术》GB/TI8936-2003进行PBS配制，pH为7.0时, 红细胞沉降效果最佳。

        4.被检血清

        理想的被检血清是淡黄色液体，无污染、无杂质、无腐败变性、无溶血、无胶冻样的物质。

        5. 1%红细胞悬液

        离心时间过长，转速过快导致红细胞破裂，引起溶血。红细胞离心后粘稠度高，可采用反向移液法配制以确保足够的红细胞量，避免出现跳孔。浓度过高，沉降点过大，血凝抑制价上升，浓度过低，沉降点过小，血凝抑制价下降。同一批次的血清样品不宜更换不同批次的红细胞，边加边混匀。从最后一孔开始加红细胞,滴头避免接触孔内液体，影响结果。

        6. 其它因素

        6.1 器材

        96 孔V型板比U型板的实验结果判定更准确。吸头一次性使用，及时更换可避免污染。使用微量移液器速度不宜过快，加样时悬滴。稀释样品不宜产生气泡，吸头不宜紧贴孔底，注意慢吸快打，吸头内不留液体。振荡器振荡时间不宜太长或强度太大，避免红细胞破裂。

        6.2实验室环境温度

温度过高，时间过长，结果出现快，使整板无凝集现象，使得结果误判。