传染性法氏囊病是由双RNA病毒科的禽双RNA病毒属的传染性法氏囊病毒（IBDV）引起的一种高度传染性的疾病，呈急性并伴有严重免疫抑制，主要影响青年鸡，造成重大的经济影响。该病于1957年首次爆发，1962年美国正式报告。早期该病的特点是广泛性的肾脏损伤，当时被称为禽肾病。该病造成的巨大经济损失来源于两个因素，它通过破坏法氏囊中含有IgM的发育中的B淋巴细胞，造成严重的免疫抑制，降低体液免疫应答能力，使鸡只更易受到感染，并易导致疫苗接种失败；3周龄或青年鸡，出现60%以上的死亡率。该病潜伏期短，约3-5天，小于3周龄的鸡没有临床症状，但导致免疫抑制。IBDV导致的免疫抑制程度，取决于感染鸡的年龄，2周龄的鸡比大日龄的鸡免疫抑制更严重。

一、基因组结构和病原学

传染性法氏囊病毒的基因组为分段的双链RNA（dsRNA），片段分为A和B，病毒粒子55-60nm，无囊膜，二十面体对称衣壳。B片段较小，编码病毒蛋白1（VP1，95kDa）。A片段（2.9kb-3.4kb）具有两个部分重叠的开放阅读框（ORF）。其中，较小的ORF编码非结构蛋白VP5（17kDa），该蛋白与病毒的致病性和病毒在细胞间传播有关；较大的ORF编码一个110kDa的多聚蛋白，通过自裂解产生3个多肽：pVP2（48kDa）、VP3（32kDa）、VP4（28kDa）。VP4作为一种具有丝氨酸-赖氨酸蛋白酶活性的蛋白，介导了这一过程。

VP1蛋白是RNA依赖的RNA聚合酶，在病毒粒子中以游离的形式存在，并且该基因组连接蛋白（VPg）附着在两个基因组片段的正链的5’端。研究表明，超强毒vvIBDV致病型的VP1基因序列形成了一个独特的簇，表明它可能来自于B片段的基因重组。VP1蛋白由于其在病毒复制效率中的作用而调节病毒毒力，通过针对VP1蛋白的RNA（DNA载体为基础）体外干扰实验来抑制病毒复制。

外衣壳蛋白VP2是主要结构蛋白，约占病毒总蛋白的51%（Heetal, 2009）。它至少有2个中和表位，可诱导产生中和抗体。它负责抗原变异、适应组织能力和病毒毒力。VP2成熟过程中的2种短肽产物在病毒附着和胞浆内易位期间，决定病毒颗粒在细胞质膜的组装和破坏过程。蛋白质被折叠成三个关键的结构域：基底、外壳和突起。VP2并不是超强毒中唯一的毒力决定因素，VP1蛋白是另一个毒力决定因素（Qi等，2013）。

内衣壳蛋白VP3（32kDa）是Y型三聚体，约占病毒总蛋白的40%，形成病毒蛋白组装的衣壳内部支架。它具有群特异性和少量的中和抗原表位，与VP1相互作用，通过其羧基末端结构域与病毒基因组物质相互作用。有学者认为，VP3蛋白通过与病毒颗粒的几乎所有成分（自身、VP2、VP1和两个基因组dsRNA）的相互作用，促进病毒复制和子代病毒的产生。

VP4（28kDa）是一种病毒自催化蛋白酶，是一种可溶性蛋白，它利用不含ATP酶结构域的丝氨酸-赖氨酸催化二元体，将多聚蛋白裂解为单独的VP2、VP3和VP4蛋白。VP4在IBDV血清型和毒株中是保守的。该蛋白通过在组装过程中不断修饰C端末梢几个小肽，在pVP2蛋白的成熟过程中发挥重要作用。

病毒非结构蛋白VP5是一种II类膜蛋白，具有细胞质N端和细胞外C端结构域。它在所有的IBDV血清1型株中具有强碱性和半保守性，并富含半胱氨酸。VP5可诱导法氏囊病变，在病毒传播和释放中发挥重要作用。该蛋白在细胞膜内积累，导致细胞活力下降。在体外培养中，VP2与VP5可诱导细胞凋亡。

二、抗原漂移和基因组RNA突变

外衣壳蛋白VP2可诱导产生中和抗体。VP2上抗原表位所在的区域具有高核苷酸变异性，表明其易受抗原转换和漂移的影响。研究表明，超强毒vvIBDV的毒力、组织嗜性和致病表型的决定因素是由VP2蛋白中253、279、284位的一些氨基酸残基控制的。反向遗传学研究数据表明，VP2高变区内253位氨基酸或任何其他氨基酸的单一突变足以改变IBDV的毒力。在从接种了经典株疫苗的鸡群中分离出来的vvIBDV中，观察到G254D的甘氨酸-丝氨酸突变，因此该突变可能导致疫苗接种失败。流行病学发现一个全新的独特株，其在VP2高变区具有独特的AA序列272T、289P及在VP1中234P位，这些序列是保守的，根据分子特征和致病性，将其称为新型IBDV（dIBDV），广泛分布在南美、欧洲、亚洲。

基于IBDV VP2分子流行病学的遗传多样性，学者建议采用新的分类法，将其分为7个基因型。一些基因型具有全球分布性，如基因1型（caIBDV）和基因3型（vvIBDV及其重组株）的成员，而基因2型（美洲发现的vaIBDV）、基因4型（南美洲发现的dIBDV）和基因5型（墨西哥发现，被认为是caIBDV和vaIBDV的重组株）的成员呈区域性分布。基因6型来自中东（沙特），与意大利的ITA基因型有92-93%的相关性，与俄罗斯的IBDV RF-5/94株有94-95%的相关性。基因7型的成员主要来自澳大利亚和少数俄罗斯。

三、血清型和致病型

IBDV在抗原上分为血清1型和血清2型。血清2型主要感染火鸡，对鸡无毒力，对血清1型也不能提供交叉保护。血清1型对鸡具有不同致病性，这源于毒力、免疫抑制和抗原性的不同。早期的IBDV疫情主要是经典株（caIBDV）引起的，法氏囊炎症、肿大，然后萎缩。20世纪80年代初，在美国、中美洲和澳大利亚出现变异株（vaIBDV），它在抗原上不同于经典株或超强毒株，只引起法氏囊萎缩，没有炎症。80年代末，西欧、东南亚和非洲出现的超强毒株（vvIBDV），特征是法氏囊肿大，然后萎缩，其毒力比经典株更强，死亡率超过70%。经典株和超强毒株会引起出血性炎症，并伴有严重的法氏囊滤泡损耗，两者仅在死亡率上有所不同（caIBDV为30-60%，vvIBDV为70-100%）。而变异株导致法氏囊快速萎缩，没有炎症、出血，死亡率10%以下或没有。接种过caIBDV疫苗的鸡群，仍然会感染变异株。变异株和超强株，以及最近新型IBDV（dIBDV）可以突破母源抗体，并感染青年鸡，蛋雏鸡死亡率高达60%，肉仔鸡死亡率达25%。超强株虽然与经典株具有抗原相似性，但是经典株母源抗体很高的鸡群，仍然会感染超强毒株。

法氏囊出血

法氏囊肿大

目前，IBD疫苗主要是灭活苗或活疫苗。种鸡接种了灭活苗或减毒活疫苗，雏鸡通过母源抗体就获得对IBD的保护。然而，母源抗体会干扰减毒活疫苗的有效性，除非使用中等毒力疫苗和强毒疫苗，这样会造成疫苗引起的法氏囊损伤，导致免疫抑制。因此，迫切需要开发安全有效的疫苗，甚至在母源抗体存在的情况下，也能诱导正确的免疫应答。

四、先天免疫应答

实验发现，使用变异株开发的减毒活疫苗和灭活疫苗，都对感染经典株或变异株的鸡具有交叉保护作用；而使用经典IBDV株开发的疫苗部分保护或不能保护变异株的感染。

基因表达研究表明，急性感染IBDV，激活了法氏囊T细胞和脾脏巨噬细胞。法氏囊细胞被耗尽，与NK细胞、巨噬细胞和T细胞激活相关的基因上调，这些基因包括干扰素、白介素和MIP-1，以及调节先天免疫系统的基因，如MD-1、MD-2、补体、热休克蛋白，以及炎性和促炎反应基因。

IBDV感染过程中先天免疫应答的遗传调控

IBDV经口感染后的8-12小时，可在肠道的单核巨噬细胞中检测到，然后这些细胞将病毒转运到法氏囊，在带IgM的B细胞内进行有效的病毒复制。感染激活NF-kB通路和其他细胞内信号通路。巨噬细胞大量浸润法氏囊可诱导促炎介质如白介素的大量表达。在IBDV的研究中，观察到中枢淋巴器官中IFN、趋化因子、补体成分、防御素的高表达。实验研究发现，NK细胞可能参与了IBDV的感染发病和先天免疫应答。

李小庆

2023.03.08